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實驗耗材:培養皿常用的清潔方法、注意事項、使用方法
培養皿材質基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養和動物細胞的貼壁培養。塑料的一般采用聚乙烯材料,有一次性的和多次使用的,適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作,可以用于植物材料的培養。BUNSEN本生
培養皿的清潔一般經過浸泡、刷洗、浸酸和清洗四個步驟。
(一) 浸泡
新的或用過的玻璃器皿要先用清水浸泡,軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來水簡單刷洗,然后用5%鹽酸浸泡過夜;用過的玻璃器皿往往附有大量蛋白質和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后應立即浸入清水中備刷洗。
(二) 刷洗
將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中,用軟毛刷反復刷洗。不要留死角,并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干,備浸酸。
(三) 浸酸
浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中,又稱酸液,通過酸液的強氧化作用去除器皿表面的可能殘留物質。浸酸不應少于六小時,一般過夜或更長。放取器皿時要小心。
(四) 沖洗
刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗,浸酸后器皿是否沖洗的干凈,直接影響到細胞培養的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿,每件器皿至少要反復注水-倒空15次以上,用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包裝備用。
1、注意事項:
使用前經過清潔消毒,,培養皿清潔與否對工作影響較大,可影響培養基的酸堿度,若有某些化學藥品的存在,會抑制細菌生長。培養皿應先用熱水沖洗,再置于質量分數為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數小時,使游離堿性物質除去,再用蒸餾水沖洗2次。
若要培養細菌,再用高壓蒸氣(一般6.8* 10的5次方Pa高壓蒸氣),120°C的溫度下30min滅菌,置室溫干燥,或用干熱滅菌,就是將培養皿置于烘箱內,度控制在120°C左右的情況下維持2h,殺死細菌的胞牙。經過消毒的培養皿才能接種培養使用。
2、使用方法:
把需要用到的試劑瓶放到工作區上合適的位置,并將即將要使用的試劑瓶蓋 子松開;把培養皿放在工作區的中心;拿掉試劑瓶的瓶蓋,用吸管從試劑瓶中吸出試劑;把培養皿的蓋子放到培養皿后面;輕輕地在培養皿一邊的基底部直接注入培養基;將培養皿的蓋子蓋上;把培養皿放到原來放置的一側,注意不要讓培養基進入到蓋子和底部只間的微小空間;將用過的吸管取出。
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